FRD - Producción Académica de Posgrado
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Item Proceso de purificación de proteínas recombinantes: Optimización en la etapa de centrifugación del Antígeno del virus de la Hepatitis B(2022-10) Rivas, Raúl; N, CEl presente trabajo fue realizado en la planta de producción del antígeno de Hepatitis B (HBsAg) del laboratorio Sanofi ubicado en el parque industrial de Pilar, en donde el mismo es sintetizado para luego ser exportado a la planta ubicada en Marcy l’Etoile, Francia. En estas instancias, se logra el producto final, la cual es una vacuna pediátrica hexavalente que se encuentra ampliamente distribuida a varios países del mundo, incluida Argentina. El proceso de producción recientemente escalado debido a la demanda de la vacuna se encuentra atravesado por el concepto de mejora continua, es por eso que el equipo de Tecnología de Proceso (MTECH – Manufacturing Technology), el cual es considerado el dueño del proceso de elaboración, a la búsqueda de diferentes estrategias con el objetivo de optimizar etapas y mejoras en el rendimiento del proceso. Este estudio se llevó a cabo sobre una de las etapas de purificación de la proteína de interés cuyo sistema de expresión es a través de cultivos de levaduras, llamada “Precipitación con PEG” cuyo fin es obtener un sobrenadante libre de contaminantes (proteínas y restos celulares). En base a la información obtenida de bibliografía sobre la teoría de la centrifugación y en la experiencia previa sobre el proceso de producción, los ensayos planteados consistieron en modificaciones de parámetros de configuración de los equipos utilizados, en este caso la centrífuga (centrífuga continua, modelo CARR® Powerfuge® P12), así como también modificaciones de parámetros de proceso tales como la velocidad de alimentación y la cantidad de producto procesado en cada ciclo de centrifugación. La industria farmacéutica está altamente regulada y es por eso por lo que los procesos de elaboración de medicamentos están registrados y aprobados por las autoridades regulatorias de los países en donde se comercializan y el margen de acción para realizar modificaciones en los procesos de producción está acotados a los rangos aprobados. A pesar de las limitaciones que significa aplicar reformas en el desarrollo de un fármaco por fuera los rangos permitidos, los resultados obtenidos en los distintos estudios llevados a cabo fueron promisorios en cuanto a que se lograron mejoras en la etapa de centrifugación respecto del punto de partida. De esta manera, el proceso (scrape regulado) pudo ser incorporado de manera definitiva al proceso de producción en el laboratorio lo que significó una reducción del valor de OD600nm de 0,323 u.a. (de 1,286 a 0,963 u.a.) y un aumento del porcentaje de pureza de IEC de 1,1% (de 74,94 a 76,01%). Así mismo, otros datos obtenidos brindaron cierta información empírica permitiendo conocer cómo se comporta el proceso de elaboración frente a cambios en los parámetros de proceso y como posibles mejoras a implementar en un futuro, por ejemplo, la implementación del proceso de 12 ciclos de centrifugación permitiría reducir el valor de OD600nm en 0,491 u.a. (de 1,286 a 0,795 u.a.) y consecuentemente un incremento del porcentaje de IEC de 4,0% (de 74,94 a 78,97%).Item Tomografía óptica coherente para la caracterización de materiales y procesos dinámicos.(2021-03-29) Sallese, Marcelo Daniel; Torga, Jorge Román; Morel, Eneas NicolásEn esta tesis se presenta la aplicación de la técnica de tomografía óptica coherente basada en el desarrollo de un interferómetro de camino común como método para caracterizar materiales y procesos dinámicos. Se exhibe la implementación de un portamuestra como parte del interferómetro en un esquema que se denominará ''housing'' a lo largo de este trabajo. Se mostrará como el uso de este nuevo accesorio implica una serie de ventajas constructivas, una disminución de partes móviles del sistema experimental, una reducción del costo del equipo y, la posibilidad de ampliar la aplicabilidad de la técnica a mediciones con alta resolución espacial. En el marco de cuantificar esta serie de mejoras se efectuaron un conjunto de experimentos para establecer las características generales, como su resolución espacial, rango de medición, repetitividad y mediciones comparativas con un equipo comercial basado en una técnica óptica similar en colaboración con otro grupo de investigación. Se establecieron las bases para el desarrollo de un equipo de uso industrial en una configuración experimental capaz de medir diferentes tipos de muestras y que permite obtener tanto la topografía, en el caso de materiales opacos, como la tomografía, en el caso de materiales transparentes y semitransparentes. Se demostró la aplicación del sistema abarcando mediciones de cambios en el índice de refracción de materiales por procesos como el curado en etapas de una resina por irradiación UV y la obtención de tomografías de muestras líquidas en forma de gota. Además, se caracterizaron impresos con tintas conductivas en sustratos flexibles, una muestra tratada por ablación láser y se realizó un estudio dinámico del proceso de imbibición en silicio poroso. Se dedicó un capítulo a cada uno de estos casos con una breve introducción del tema, el área de aplicación y cómo surgió cada demanda en concreto. Finalmente se exponen conclusiones generales del trabajo realizado y, con base en cada aplicación y los resultados obtenidos, se plantean diferentes ideas como preludio de futuras líneas de investigación.Item Autoensamblado de nanopartículas coloidales(2021-04-16) Di Gregorio, Laura Vanina; Scarpettini, AlbertoEn el presente trabajo se lleva a cabo la síntesis de nanobastones de oro mediante el método de crecimiento mediado por semilla. Seguidamente se analiza el autoensamblado de los nanobastones de oro utilizando dos tipos de metodologías: la técnica impresión por microcontacto usando moldes poliméricos y el autoensamblado vertical inducido por evaporación. Este ensamblado puede tener un gran efecto sobre las propiedades medibles de los nanobastones, lo que lo hace particularmente aplicable al desarrollo de plataformas multifuncionales y a la implementación práctica de dispositivos nanoestructurados para la detección de una variedad de analitos. Los principales desafíos hacia la integración de superestructuras de nanopartículas en aplicaciones comercialmente viables, son la simplificación del proceso de autoensamblado, la reducción de costos y la escalabilidad.Item Estudio de la fermentación en panes funcionales, reducidos en grasas, carbohidratos y sal.(2014) Conde Molina, Débora; Arqueros, ValeriaSe estudió el proceso de fermentación del pan lacteado reducido en grasa, azúcar, carbohidratos o sal. Para ello se evaluaron sustitutos disponibles en el mercado, con el fin de estudiar los efectos producidos en los panes funcionales, contribuyendo en las campanas de estilos de vida saludables. Se comparó el efecto de la adición de grasa con el sustituto Toler Fat Less Saladas sobre la harina y el pan lacteado. La panificación experimental mostró una estructura de la miga pareja, con alveolos homogéneos para ambos casos. El reemplazo de azúcar se empleó por Granofiber Sweet. En la fermentación se observó similar desarrollo de masa y producción de gas, lo mismo para el rendimiento del producto final. La sustitución de harina se estudió con la incorporación de Granofiber Sym 200. Se observó una disminución del desarrollo de masa con respecto a la harina base. En la panificación se detectó menor volumen de las piezas cocidas, aunque esta caída de volumen no fue tan grande como la registrada en el desarrollo de masa durante la fermentación. La sustitución de sal se evaluó con Granosalt CV Sustisal 100. Se observó que el efecto de presión osmótica sobre la levaduraItem Dispositivos plasmonicos nanoestructurados(2019-09) Gutierrez, Marina Veronica; Scarpettini, Alberto FrancoLas partículas metálicas nanoestructuradas tienen la peculiaridad de tener propiedades ópticas, que pueden ser dominadas mediante el control de ciertos parámetros en su fabricación. Particularmente, los nanobastones de oro (Nbos) son de interés por su simplicidad y por poseer resonancias plasmónicas superficiales sintonizables en el rango visible e infrarrojo del espectro electromagnético. A partir de ellos, se pueden diseñar sensores plasmónicos eficientes y muy sensibles, detectores de una única molécula, etc. Es primordial tener control eficiente y repetible de la forma y el tamaño de los Nbos monodispersos sintetizados por química húmeda. Esto se logro aplicando un método de crecimiento mediado por semillas y conociendo la influencia de cada parámetro involucrado y la incorporación de aditivos aromáticos al surfactante responsable de la estabilización. Se modificaron químicamente sustratos de vidrio, y se adsorbieron Nbos sobre ellos, mediante un proceso de dip-coating. Se monitoreo las dinámicas de adsorción y agregación de Nbos sobre estos sustratos mediante espectros de extinción y microscopia SEM. Se relacionaron los parámetros cinéticos con la geometría del nanobastón y sus propiedades ópticas. Se realizaron mediciones de las oscilaciones mecánicas de Nbos individuales depositados sobre vidrio, mediante la técnica de espectroscopia resuelta en el tiempo, caracterizando sus frecuencias, y mostramos los efectos provocados por irradiación con laser, como es el calentamiento del Nbo y el entorno, y el reshaping por difusión atómica superficial. Realizamos los cálculos de temperatura en el Nbo y su entorno cercano y la disipación producida por difusión atómica superficial, y la contrastamos con las medidas de frecuencia obtenida en los experimentos. Además, se fabricaron sensores SERS reproducibles diseñados específicamente para detectar moléculas en muy baja concentración, que arrojaron resultados de intensificación considerables. Se depositaron Nbos sobre sustratos de films de oro que condujeron al acople entre resonancias plasmónicas localizadas y propagantes en superficie. Se hicieron encapsulados de sílice alrededor de Nbos y luego fueron depositados sobre sustratos metálicos de oro, y estudiamos el acoplamiento plasmónico entre Nbos en función de la distancia.Item Análisis de señales de emisión acústica y su relación con fuentes y sensores.(2012-11) Filipussi, Dino; Ruzzante, José; Piotrkowski, RosaLa Emisión Acústica (EA) es generada en distintas escalas espaciales y temporales abarcando desde la ruptura de ligaduras atómicas a fallas sísmicas. La información sísmica y la EA son complementarias tanto en sus aplicaciones como en su base teórica. En este trabajo se simula la señal de EA, cuya fuente es una fisura que se propaga en un medio material, a partir de un modelo de fractura cuyos fundamentos provienen de la geofísica. Se tiene en cuenta también el efecto del detector sobre la señal de EA. El objetivo de este trabajo es el análisis de las señales de EA y su relación con la fuente de fractura y el sensor que detecta las señales. Si es conocida la señal detectada queremos saber qué se puede decir de las características de la fuente y del medio donde se propagan las ondas. La duración del evento de EA, el tiempo de subida del mismo y la amplitud relativa son estimados con el modelo y se relacionan con las características de la fuente de fractura. La longitud de la fisura, en orden de magnitud, queda determinada por el análisis del espectro de Fourier de la señal. Se aplicaron los resultados de este modelo a señales de EA generadas durante ensayos de “expansión”. Las probetas, placas planas, se diseñaron con un orificio para permitir el avance de una herramienta de forma cónica accionada por una máquina de ensayo industrial de forma tal de aumentar el diámetro del orificio (expansión) hasta la rotura. El material utilizado fue metacrilato de metilo (acrílico), de rotura frágil. Se compararon los resultados experimentales con el modelo desarrollado. El espectro de las señales de EA en la rotura es de la misma forma que el predicho por el modelo como así también lo es el valor de la longitud de la fractura.